Thermocycle+Conditions+5-9-13+40s

Thermocycle Conditions 5-9-13

95 C 30 s, 95 C hold, 95 C 2 min, 95 C hold, 95 C 2 min, 95 C 30 s, 60 C 30 s, 72 C 40 s, 95 C 30 s, 59 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 58 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 57 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 56 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 55 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 54 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 53 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 52 C 30 s, 72 C 40 s,  95 C 30 s, 51 C 30 s, 72 C 40 s,  (95 C 30 s, 50 C 30 s, 72 C 40 s)X40, 72 C 5 m, 4 C hold

1st part to warm up thermocycler 2nd part to denature 3rd part to add polymerase and denature further 10 decreasing annealing temperature cycles for touchdown amplification for 40 cycles